
亚硝酸盐普遍存正在于泥土、水、蔬菜及腌制的动物性食物中,也是普遍存正在于自然境遇中的化学物质。自然界中的良众食品,囊括粮食、蔬菜、鱼类、蛋类、肉类中都含有亚硝酸盐。蔬菜是人们闲居糊口中摄入量最众的,也是一种易于富集硝酸盐的植物性作物。
据邦际粮农机合1990年统计,人体所需的90%维生素C、60%维生素A均来自蔬菜,蔬菜供给人体所需维生素的同时,也供给了进入人体80%~90%的硝酸盐。当代医学外明,固然硝酸盐对人体没有直接迫害效用,但过量的硝酸盐进入人体后,正在极少酶和微生物效用下可改变为有毒的亚硝酸盐。亚硝酸盐是强氧化剂,进入血液与血红卵白维系,使氧合血红卵白变为高铁血红卵白,从而落空携氧才力,导致机合缺氧,而显露一系列缺氧的中毒病症,紧张时可使人去逝。此外,亚硝酸盐对血管有扩张效用,它还可与胃中的次级胺维系造成致癌物质亚硝酸胺,惹起消化编制癌变;亚硝酸盐也可能通过胎盘进入胎儿体内,惹起胎儿畸变。因而,硝酸盐和亚硝酸盐含量是评议蔬菜品格的紧张目标之一。
遴选以黄瓜为例的瓜类、以白菜为例的绿叶类、以茄子为例的茄果类蔬菜举动试材。
1、饱和硼砂溶液(50g/L):称取5.0g硼酸钠(Na2B07·10H2O),溶于100mL热水中,冷却后备用。
4、对氨基苯磺酸溶液(4g/L):称0.4g对氨基苯磺酸,溶于100mL20%(V/V)盐酸中,混匀后,至棕色瓶中,避光保管。
5、N-(1-萘基)-乙二胺盐酸盐溶液(2g/L):称取0.2gN-(1-萘基)-乙二胺盐酸盐,溶入少量水中后通盘转化至100mL容量瓶中,加水至标线,混匀。置于棕色瓶避光保管。
6、亚硝酸钠尺度溶液(100g/L):确凿称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠,加水移入1000mL容量瓶,加水稀释至刻度,混匀。
7、亚硝酸钠尺度溶液(10g/L):临用前,罗致10mL亚硝酸盐尺度溶液,置于100mL容量瓶,加水稀释至刻度。
所用试剂未声明均为了解纯,实行用水均为去离子水。全部实行用的玻璃仪器均用去离子水冼涤使其彻底洁净,以确保无外来硝酸根离子(NO3-)和亚硝酸根离子(NO2-)的扰乱。
采用邦度尺度(GB5009.33-2010)盐酸萘乙二胺法。配制一系列各浓度的亚硝酸盐溶液:取10ug/mL亚硝酸钠尺度操纵液0.00mL、0.10mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.60mL、2.00mL,阔别置于50mL带塞比色管中。于尺度管平分别参与2mL对氨基苯磺酸溶液,混匀,安插3-5min,参与1mL盐酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置15min,用2cm比色皿,以零管调剂零点,于波长538nm处测吸光度,以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制亚硝酸盐的尺度弧线。
参考马巍(1999)[8]措施,采用加外标接纳率的形式验证样品消解亏损水准和措施简直凿度。
配制10ug/mL亚硝酸盐尺度溶液,移取0.8mL的该尺度溶液于50mL比色管内,遵守重氮化巧合法正在538nm处反复测定标样7次,策动吸光度的均匀值和尺度均匀误差。
由尺度弧线)可知,尺度劳动弧线线性精良,差别浓度的亚硝酸盐正在538nm处的吸光度是呈线性法则,其回归方程为y=0.6489x+0.0023,线以上。
由图2可能看出,差别温度下溶液对亚硝酸盐的融解量及提取速率存正在分别,100℃时,水浴时辰45min提取的亚硝酸盐含量最高;70℃时,水浴时辰45min提取的亚硝酸盐含量最高,但两种温度比拟70℃水浴下提取的亚硝酸盐含量更为高,因而提取亚硝酸盐的最佳水浴条款是70℃的水浴45min。
差别显色时辰对亚硝酸盐检测结果的影响测定结果(睹图3)显色15min时,亚硝酸盐含量检出率最高,之后跟着显色时辰的耽误,亚硝酸盐的吸光度变小,35min后虽稍有上升,但幅度不大。亚硝酸盐和显色剂响应可天生络合物,显色15min时,其吸光度最大。故宜遴选15min举动显色时辰。
活性炭对亚硝酸盐含量的测定结果(睹图4)可能看出,参与活性炭的试验组样品中亚硝酸盐检出值为3.50mg/kg,无活性炭的试验组样品亚硝酸盐检出值为1.00mg/kg,二者分别极明显。活性炭可驱除抗坏血酸对亚硝酸盐测定的扰乱,使得亚硝酸盐检出值更为确凿。因而,宜遴选参与活性炭照料,以降低检出率。
样品亚硝酸盐接纳率试验测定结果(睹外1)解释,3个样品的亚硝酸盐接纳率阔别为91.11%、91.00%、102.00%,均匀接纳率为94.63%,相对均匀误差为5.1%。检出限数值越低,仪器和措施的聪慧度越高;内标接纳率越高,仪器简直凿度和细密度越高;外标接纳率越高,消解亏损水准越低,措施确凿度越高。正在行使分光光度法对样品实行测守时,平凡须要测出所用措施的待测元素的接纳率,以此评议措施简直凿度和牢靠性,接纳率越贴近1,则措施的牢靠性越高。
由细密度试验测定结果(睹外2)可睹,通过反复测定标样七次和策动吸光度的反复性,亚硝酸盐的相对尺度误差为0.29%,小于2%,解释十足可知足试验细密度央求。
采用邦标(GB5009.33-2010)盐酸萘乙二胺法测定蔬菜中亚硝酸盐,样品前照料的最佳条款是正在70℃水浴45min,显色15min,参与活性炭实行驱除抗坏血酸照料,均匀接纳率可到达94.63%,亚硝酸盐的相对尺度误差为0.29%,相对均匀误差为5.1%。